INTRODUCCIÓN

El análisis de la composición de oligosacáridos unidos a asparagina (Asn) (también conocidos como oligosacáridos N-ligados o N-glicanos) se ha vuelto necesario para la caracterización de ciertas proteínas terapéuticas recombinantes o para establecer sus especificaciones de liberación. Ver el capítulo Análisis de Glicoproteínas y Glicanos—Consideraciones Generales 〈1084〉 para información sobre la caracterización y evaluación de la glicosilación de proteínas. El capítulo 〈1084〉 incluye estrategias analíticas generales y también resalta criterios para seleccionar métodos apropiados para desafíos analíticos específicos, proveyendo así el contexto para este capítulo. Este capítulo se enfoca en el análisis de oligosacáridos unidos a Asn escindidos enzimáticamente de proteínas terapéuticas recombinantes glicosiladas. Por lo tanto, el capítulo provee 1) un procedimiento genérico para la liberación enzimática de N-glicanos usando N-glicosidasa F (PNGasa F) peptídica, 2) dos métodos diferentes para el marcado con fluoróforos de los N-glicanos liberados y 3) cinco procedimientos analíticos de separación cromatográfica y electroforética, así como criterios de desempeño para la separación. El capítulo 〈1084〉 trata estrategias analíticas alternativas. Aunque los procedimientos de este capítulo están validados, estos deben ser verificados para cada producto específico individual (ver Verificación de Procedimientos Farmacopeicos 〈1226〉). Además, la validación es necesaria cuando se modifica el procedimiento para optimizarlo a un producto específico [p. ej., fuera de los límites de los parámetros permitidos que se definen en Cromatografía 〈621〉, Aptitud del Sistema (ver Validación de Procedimientos Farmacopeicos 〈1225〉)]. Las monografías individuales de los productos proveerán el análisis de datos, la cuantificación y las especificaciones de liberación de lote, las cuales se espera sean específicas para cada producto. Por lo tanto, estos aspectos no se tratan en este capítulo.