INTRODUCCIÓN

La composición de glicanos de glicoproteínas terapéuticas puede tener impacto sobre la actividad biológica, la estabilidad, la farmacocinética, la farmacodinámica, la eficacia y la inmunogenicidad de la molécula. El patrón de glicosilación o aspectos específicos de esta, tales como el grado de sialilación, pueden formar parte de la caracterización del producto y las especificaciones de liberación. Un método para asegurar la uniformidad de la glicosilación y el cumplimiento del producto con las especificaciones es cuantificar los monosacáridos específicos presentes en el producto. Los monosacáridos se liberan mediante la degradación del producto y se cuantifican por métodos cromatográficos. Los azúcares que se determinan con mayor regularidad son el ácido N-acetilneuramínico (Neu5Ac) y su variante el ácido N-glicolilneuramínico (Neu5Gc). Estos monosacáridos pueden liberarse de manera selectiva de la proteína ya sea mediante hidrólisis con ácido diluido o por métodos enzimáticos, mientras que condiciones de hidrólisis cada vez más agresivas liberan monosacáridos neutros, incluyendo manosa, galactosa y fucosa, y después glucosamina y galactosamina. La separación y cuantificación de monosacáridos liberados mediante cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) puede lograrse con o sin marcación de estos con fluoróforos.