INTRODUCCIÓN

La Proteína A se acopla a un soporte de resina con el fin de crear medios cromatográficos de afinidad con la proteína A, usados comúnmente en la fabricación de anticuerpos monoclonales terapéuticos recombinantes. La proteína A natural se obtiene del Staphylococcus aureus y contiene cinco regiones homólogas de unión a anticuerpos y una región C-terminal para unión a la pared celular. Además de la proteína A de origen natural, existe en el mercado proteína A recombinante producida en Escherichia coli, así como varias versiones de la proteína modificadas por ingeniería, también fabricadas en forma recombinante. Cuando se inmoviliza sobre una columna, la proteína A proporciona un método altamente eficiente y robusto para purificar anticuerpos en diversas escalas. Sin embargo, la proteína A inmovilizada en la columna (ligando de proteína A) puede también coeluir con el anticuerpo durante la purificación, un efecto conocido a menudo como leaching de la proteína A. Esta tendencia aumenta a medida que envejece el medio cromatográfico. Las versiones de la proteína A modificadas por ingeniería podrían mejorar la tolerancia del medio al pH, pero no eliminan el leaching. La expectativa reglamentaria actual se centra en que la proteína A coeluida se elimine durante la purificación de los anticuerpos para uso humano y los procesos de fabricación se validen de acuerdo con ello. Generalmente, durante el desarrollo y validación del proceso se utiliza un Enzimoinmunoensayo (ELISA) para asegurar la eliminación eficiente de la proteína A residual durante las etapas del proceso posteriores a la cromatografía de afinidad con la proteína A. Adicionalmente, el fabricante deberá poseer un claro conocimiento y documentación sobre la calidad de la resina y el ligando, mediante la calificación de las materias primas y estudios de vida útil de la columna.